Studium cytoskeletu a ultrastrukturální charakteristika vybraných patogenních kvasinek - Malassezia pachydermatis a Cryptococcus laurentii
| Autoři | |
|---|---|
| Rok publikování | 2007 |
| Druh | Odborná kniha |
| Fakulta / Pracoviště MU | |
| Citace | |
| Popis | Předkládaná disertační práce byla zaměřena na studium cytoskeletu, ultrastruktury a morfologie dvou potenciálně patogenních, bazidiomycetových kvasinek – Malassezia pachydermatis a Cryptococcus laurentii. Z cytoskeletálních struktur byly imunofluorescenčně u obou mikroorganizmů identifikovány mikrotubuly a byla poznána jejich distribuce a dynamika v průběhu buněčného cyklu. V buňkách byly pozorovány cytoplazmatické mikrotubuly během interfáze, difúzní fluorescence v pupenu před započetím mitotického dělení a dělící vřeténko s astrálními mikrotubuly v M-fázi. U obou studovaných druhů bazidiomycetových kvasinek byl zjištěn přesun jádra do pupenu před jeho rozdělením. Pro vizualizaci mikrotubulů u Malassezia pachydermatis byla nezbytná prodloužená inkubace buněk se stěnovými lytickými enzymy. Fluorescenční a imunofluorescenční barvení aktinového cytoskeletu Malassezia pachydermatis se nezdařilo. Aktin byl u této kvasinky identifikován pouze imunoznačením na ultrastrukturální úrovni. Zjištěný aktin byl převážně asociován s plazmatickou membránou. U opouzdřeného kmene Cryptococcus laurentii byly imunofluorescenčním značením prokázány aktinové tečky, lokalizované zejména v rychle rostoucích částech buněk a během cytokineze při bázi pučení. Při fluorescenčním barvení rhodamin-faloidinem nebyly v buňkách tohoto kmene aktinové struktury prokázány. Barvivo se zřejmě vázalo na komponenty pouzdra. Fluorescenčně byl F-aktin identifikován a jeho distribuce a dynamika byly poznány v průběhu buněčného cyklu neopouzdřeného kmene Cryptococcus laurentii. Absence pouzdra na buněčném povrchu byla u tohoto kmene potvrzena jak na tušových preparátech, tak pomocí rutheniové červeně na ultratenkých řezech. V buňkách se během celého buněčného cyklu nacházely aktinové tečky a to především akumulované v místech intenzivního růstu. U pučících buněk byla identifikována aktinová vlákna, která z mateřské buňky směřovala nejprve do krátké stopky a následně do rostoucího pupenu, jenž se na stopce vytvářel. Po dokončení mitotického dělení aktinová vlákna zanikla a při bázi pučení se vytvořil cytokinetický prstenec. Rozložení a dynamika aktinového cytoskeletu Cryptococcus laurentii byly podobné jako u příbuzného druhu Cryptococcus neoformans. U Cryptococcus laurentii však byl F-aktin chudší. Stádia buněčného cyklu, která byla u studovaných druhů rozlišitelná prostřednictvím fluorescenční mikroskopie, byla detekována také na ultrastrukturální úrovni, včetně přesunu jádra do pupenu před zahájením mitotického dělení. |
| Související projekty: |